RESUMO Objetivo: Descrever os achados em citologia de impressão de conjuntiva sadia de coelho submetida ao uso de colírio de interferon alfa-2b e compará-los ao que foi encontrado após uso da mitomicina C 0,02%. Métodos: Estudo experimental realizado em modelo animal no período entre setembro de 2013 e outubro de 2014 nas dependências da Faculdade de Medicina de Marília, da Universidade Federal de São Paulo e da Clínica de Olhos Moacir Cunha. Trinta coelhos albinos da raça Nova Zelândia foram divididos em seis grupos e receberam interferon alfa-2b ou mitomicina C. A citologia de impressão foi realizada antes do início dos colírios e após 15, 30, 60 dias de seu uso. As seguintes variáveis foram analisadas na citologia de impressão: células caliciformes, celularidade, adesão intercelular, razão núcleo/citoplasma, cromatina, células inflamatórias, queratinização e citomegalia. Resultados: Os principais achados na citologia de impressão após o uso do interferon alfa-2b foram a redução de células caliciformes (50,8%), a diminuição da adesão intercelular (26,2%), a alteração da razão N/C (20%) e a redução da celularidade (15,4%). Após o uso da mitomicina C 0,02%, foram mais frequentes a redução das células caliciformes (46,2%), a alteração da razão N/C (25,6%), a adesão intercelular (23,1%) e a redução da celularidade (20,5%). Não houve diferença estatisticamente significante para nenhuma das variáveis estudas quando se compararam as citologias de impressão após interferon alfa-2b com as citologias de impressão após mitomicina C 0,02%. Independentemente da substância utilizada, as citologias colhidas 30 e 60 dias após início das drogas apresentaram maior redução de células caliciformes quando comparadas com as citologias de impressão colhidas após 15 dias. Conclusão: A redução das células caliciformes, a diminuição da adesão intercelular, a alteração da razão N/C e a diminuição da celularidade foram as alterações mais frequentes na citologia de impressão colhida após o uso de interferon alfa-2b. Os achados em citologias de impressão após o uso de interferon alfa-2b são semelhantes àqueles encontrados após o uso da mitomicina C 0,02%.

ABSTRACT Objective: To describe ocular surface findings in impression cytology obtained from healthy rabbit conjunctiva treated with interferon alpha-2b eyedrop, and compare them to findings after use of mitomycin C 0.02%. Methods: An experimental study using a rabbit model was performed between September 2013 and October 2014 at the Faculdade de Medicina de Marília, Universidade Federal de São Paulo, Clínica de Olhos Moacir Cunha. Thirty New Zealand white rabbits were divided into 6 groups and received interferon alpha-2b or mitomycin C 0.02%. Impression cytology (IC) was performed prior to topical applications and at15, 30 and 60 days of use. The following variables were analyzed in impression cytology: goblet cells, cellularity, cell-to-cell adhesion, nucleus/cytoplasm ratio, nuclear chromatin, inflammatory cells keratinization, and cytomegaly. Results: The major findings in impression cytology after us of interferon alpha-2b included loss of goblet cells (50.8%), reduced cell-to-cell adhesion (26.2%), abnormal nucleus/cytoplasm ratio (20%) and reduced cellularity (15.4%). After use of mitomycin C 0.02%, the most common changes included loss of goblet cells (46.2%), abnormal nucleus/cytoplasm ratio (25.6%), less cell-to-cell adhesion (23.1%), and reduced cellularity (20.5%). There were no significant differences in any variable when comparing impression cytology after interferon alpha-2b and after mitomycin C 0.02%. Goblet cell loss was more pronounced at days 30 and 60, as compared to impression cytology at day 15 for both drugs. Conclusion: The loss of goblet cells, reduced cell-to-cell adhesion and cellularity, along with abnormal nucleus/cytoplasm ratio were the most common findings in impression cytology after use of interferon alpha-2b. These findings are similar to those described for use of mitomycin C 0.02%. ..

RESUMO Objetivo: Avaliar a segurança e o efeito de 12 meses de tratamento com fotocoagulação pelo pattern scanning laser para neoplasia escamosa da superfície ocular em um ambiente com poucos recursos e acesso extremamente limitado a um tratamento cirúrgico. Métodos: Pacientes adultos com diagnóstico de neoplasia escamosa de superfície ocular foram submetidos a exame oftalmológico completo. Após anestesia tópica e instilação de azul de toluidina 1%, a lesão foi tratada com laser por um tempo de duração que variou de 20 a 100 ms e potência de 600 a 1800 mW. Os pacientes foram examinados semanalmente durante o primeiro mês e foram retratados semanalmente das lesões restantes, conforme necessário. Os pacientes tiveram um seguimento mínimo de 12 meses. Resultados: Trinta e oito pacientes (38 olhos) foram incluídos no estudo. Todos os pacientes apresentaram neoplasia escamosa da superfície ocular clínica, confirmada por citologia de impressão. A idade dos pacientes variou entre 40 e 83 anos (média de 65.5 anos) e 28 deles eram do sexo masculino (74%). Os pacientes foram divididos em dois grupos: Grupo I (imunocompetente) e grupo II (imunossuprimido). No grupo I, 23 pacientes (74%) apresentaram resposta completa com o controle da lesão após o tratamento com laser. No grupo II, dois dos sete pacientes (28%) apresentaram resposta ao tratamento durante o acompanhamento. A média de aplicações de laser foi de 2,5 (1 a 6 aplicações). Os procedimentos foram bem tolerados. Conclusões: Os resultados a curto prazo da abordagem de fotocoagulação a laser para o tratamento das lesões conjuntivais de neoplasia escamosa de superfície ocular foram favoráveis, com uma taxa de sucesso de 74% observada em pacientes imunocompetentes. Essa nova estratégia é uma alternativa menos intensiva em recursos que pode demonstrar sua utilidade em ambientes com escassez de salas cirúrgicas e em casos recorrentes. Estudos com acompanhamentos mais longos e amostras maiores são necessários para confirmar nossos achados e avaliar a eficácia do tratamento a laser associado à quimioterapia tópica.

ABSTRACT Purpose: To evaluate the safety and 12-month effect of treatment with pattern scanning laser photocoagulation for ocular surface squamous neoplasia in a low-resource setting with extremely limited access to an operating room. Methods: Adult patients with a clinical diagnosis of ocular surface squamous neoplasia underwent a complete ophthalmologic examination. After topical anesthesia and instillation of toluidine blue 1%, the lesion was treated using pattern scanning photocoagulation for a duration time that varied from 20 to 100 ms and power from 600 to 1,800 mW. Patients were examined on a weekly basis for the first month and underwent weekly retreatment of the remaining lesions, as necessary. Patients had a minimum follow-up of 12 months. Results: Thirty-eight patients (38 eyes) were included. All patients had clinical ocular surface squamous neoplasia that was confirmed by impression cytology. The age of patients ranged from 40 to 83 years (average: 65.5 years) and 28 of them were males (74%). The patients were divided into two groups: group I (immunocompetent) and group II (immunosuppressed). In group I, 23 patients (74%) presented complete response with lesion control after laser treatment alone. In group II, two of seven patients (28%) showed treatment response during the follow-up. The average number of treatments was 2.5 (one to six laser treatments). Procedures were well tolerated. Conclusion: Short-term results of the laser photocoagulation approach for the treatment of ocular surface squamous neoplasia conjunctival lesions were favorable, with a 74% success rate observed in immunocompetent patients. This novel strategy is a less resource-intensive alternative that could demonstrate its usefulness in settings with shortages in operating rooms and in recurrent cases. Studies with longer follow-ups and larger sample sizes are warranted to confirm our findings and evaluate the effectiveness of laser treatment in association with topical chemotherapy.

A citologia de impressão (CI) tem sido amplamente utilizada como um método de avaliação da superfície ocular e das camadas de células superficiais no diagnóstico e no seguimento após tratamento de vários tumores da superfície ocular de origem epitelial ou melanocítica. As informações podem sem encontradas na literatura em língua inglesa desde 1992. Utilizando-se de membranas de acetato de celulose ou Biopore na coleta dos espécimes, uma alta correlação tem sido encontrada entre a CI e a histologia do tecido. Comparando-se com a citologia esfoliativa, a citologia de impressão é menos traumática para o olho do paciente, fornece uma localização precisa da área estudada e permite ver as células da forma como elas organizam-se in vivo. A vantagem adicional da citologia de impressão é a preservação das células- tronco germinativas responsáveis pela renovação contínua do epitélio da córnea. Elas podem ser afetadas após biópsia cirúrgica na região do limbo que é o sítio mais frequentemente acometido pelos tumores do epitélio estratificado. O tratamento para a neoplasia escamosa da superfície ocular tem sido historicamente a cirurgia, mas intervenções não cirúrgicas também foram adotadas. Por esta razão, em certos casos, oftalmologistas podem recorrer a formas menos invasivas que a biópsia cirúrgica (como a citologia de impressão) tanto para o diagnóstico inicial quanto para o monitoramento terapêutico das lesões da superfície ocular. No entanto, deve-se ter em mente que a citologia de impressão deixa de ser útil quando seu resultado não coincide com o quadro clínico ou quando o diagnóstico clínico é incerto e o resultado da citologia de impressão negativo. Nesses casos, a biópsia cirúrgica deve ser realizada para o diagnóstico. O objetivo desta revisão é examinar a literatura sobre a utilização da citologia de impressão no diagnóstico e tratamento dos tumores da superfície ocular bem como discutir a necessidade de uma investigação mais aprofundada sobre o assunto.

Impression cytology (IC) has been widely used as a method for evaluating the ocular surface and superficial cells layers in the diagnosis and follow-up after treatment of several ocular surface tumors of both epithelial and melanocytic origin. Information regarding this can be found in the English-language literature since 1992. Using either cellulose acetate or Biopore membranes for specimen collection, a high correlation has been found between IC and tissue histology. Compared with exfoliative cytology with spatula, IC is less traumatic to the patient’s eye, provides a precise location of the area being studied, and allows accurate observation of the cells the way they exist in vivo. The additional advantage of IC is the preservation of limbal stem cells responsible for continuous corneal epithelium renewal; these can be affected after incisional or excisional biopsy at the corneoscleral limbus, which is the most frequent site of appearance of tumors in the stratified epithelium. Treatment for ocular surface squamous neoplasia has historically included surgery, but nonsurgical interventions have also been adopted. Hence, in certain cases, ophthalmologists may prefer interventions less invasive than surgical biopsy such as of impression cytology for both initial diagnosis and therapeutic monitoring of treatment for ocular surface lesions. Nevertheless, it should be considered that IC may be less helpful if the results conflict with the clinical picture or if the clinical diagnosis is uncertain and results are negative. In such cases, surgical biopsy is required for accurate diagnosis. The purpose of this review is to examine the published literature on the utilization of IC for the diagnosis and management of ocular surface tumors and to discuss the requirement for further investigation on the subject.

Objetivo: Avaliar a concordância entre a citologia de impressão (CI) e os achados histopatológicos de lesões epiteliais clinicamente diagnosticadas como pterígio, no que tange a detecção de células de neoplasia escamosa da superfície ocular (NESO) insuspeita associada. Métodos: Trinta e dois pacientes brasileiros foram incluídos e a CI foi obtida de todos os pterígios antes da excisão. O exame histopatológico foi realizado por dois patologistas oculares experientes em consenso de opinião e considerado o padrão-ouro para o diagnóstico. A acurácia da CI foi avaliada pela sensibilidade e especificidade com intervalo de confiança de 95% Resultados: Das 32 lesões estudadas, o exame histopatológico confirmou o diagnóstico de pterígio sem atipia em 19 casos (60%) e mostrou células de NESO insuspeita associada em 13 espécimes (40%). A CI demonstrou um resultado falso-positivo e um falso-negativo para atipia. A análise estatística mostrou uma sensibilidade estimada de 92%, especificidade de 94%, valor preditivo positivo de 92% e valor preditivo negativo de 94%. Conclusão: A CI apresentou alta concordância com o estudo histopatológico na detecção de células epiteliais atípicas de NESO insuspeita em pterígios do Brasil.

Purpose: To evaluate the agreement between the methodologies of impression cytology (IC) and histopathology regarding epithelial lesions clinically diagnosed as pterygium and also regarding the detection of unsuspected and associated ocular surface squamous neoplasia (OSSN). Methods: Thirty-two Brazilian patients were included and IC was performed on all pterygia before excision. Histopathogical examination was considered the gold standard and was performed by two experienced ocular pathologists in which consensus existed regarding pterygia diagnosis. IC accuracy was assessed by sensitivity and specificity with a 95% confidence interval. Results: From the 32 primary lesions studied, histopathological examination confirmed the diagnosis of pterygium without atypical cells in 19 cases (60%) and showed unsuspected and associated OSSN cells in 13 cases (40%). IC demonstrated one false-negative and one false-positive result for atypia. Statistical analysis showed an estimated sensitivity of 92%, specificity of 94%, positive predictive value of 92%, and negative predictive value of 94%. Conclusion: IC demonstrated high agreement with histopathological analysis in the detection of atypical epithelial cells in unsuspected OSSN in Brazilian pterygia patients.

Os autores descrevem o caso de uma mulher branca de 65 anos que apresentava um melanoma amelanótico maligno conjuntival e destacam as características clínicas e patológicas desta entidade rara com crescimento invasivo exclusivo na córnea sem evidência de tumores na conjuntiva além de melanose adquirida primária sem pigmento. A citologia de impressão auxiliou no diagnóstico inicial. A paciente foi submetida a tratamento cirúrgico. A histopatologia e a imuno-histoquímica revelaram um melanoma amelanótico invasivo limitado sobre a córnea exibindo positividade para proteína S-100, Melan A e HMB-45. A ausência de pigmentação retardou sua identificação clínica e seu tratamento precoce. O conhecimento deste melanoma não pigmentado é importante para o reconhecimento precoce e a conduta apropriada.

Here we describe the case of a 65-year-old Caucasian female who presented with an amelanotic malignant conjunctival melanoma and highlight the clinical and pathological features of this rare entity that displayed exclusive corneal invasive growth without evidence of conjunctival tumors other than primary acquired melanosis. Impression cytology aided in the initial diagnosis. The patient underwent surgical treatment. Histopathology and immunohistochemistry revealed an invasive amelanotic melanoma limited to the cornea and exhibiting S-100, Melan A, and HMB-45 positivity. The absence of pigmentation delayed early clinical detection and treatment. Awareness of this nonpigmented melanoma is important for early recognition and appropriate management.

OBJECTIVES: To compare ocular surface changes induced via glaucoma treatment in patients using fixed combinations of prostaglandin analogues (travoprost, latanoprost and bimatoprost) with 0.5% timolol maleate METHODS: A prospective, multicenter, randomized, parallel group, single-blind clinical trial was performed in 33 patients with ocular hypertension or open angle glaucoma who had not been previously treated. The ocular surface was evaluated prior to and three months after treatment, with a daily drop instillation of one of the three medications. The main outcome measurements included the tear film break-up time, Schirmer's test, Lissamine green staining, the Ocular Surface Disease Index questionnaire, impression cytology using HE and PAS and immunocytochemistry for interleukin-6 and HLA-DR. Ensaiosclinicos.gov.br: UTN - U1111-1129-2872 RESULTS: All of the drugs induced a significant reduction in intraocular pressure. Decreases in the Schirmer's test results were observed with all of the drugs. Decreases in tear-film break-up time were noted with travoprost/timolol and latanoprost/timolol. An increase in the Lissamine green score was noted with travoprost/timolol and bimatoprost/timolol. The Ocular Surface Disease Index score increased after treatment in the travoprost/timolol group. Impression cytology revealed a significant difference in cell-to-cell contact in the same group, an increase in cellularity in all of the groups and an increase in the number of goblet cells in all of the groups. The fixed combinations induced an increase in IL-6 expression in the travoprost/timolol group, in which there was also an increase in HLA-DR expression. CONCLUSIONS: All of the fixed combinations induced a significant reduction in intraocular pressure, and the travoprost/timolol group showed increased expression of the inflammatory markers HLA-DR and interleukin-6. All three tested medications resulted in some degree of deterioration in the ocular surface after three months of glaucoma treatment.

OBJETIVO: Relatar os resultados de citologia de impressão após o "cross-linking" da córnea e inserção dos segmentos de anéis corneanos intraestromais para ceratocone. MÉTODOS: Trinta e nove olhos foram distribuídos em dois grupos: pacientes no grupo cross-linking foram submetidos ao procedimento do "cross-linking" corneano e pacientes no grupo colírio de riboflavina receberam o colírio de riboflavina 0,1% (w/v) -20% dextran para uso tópico por um mês. Após três meses, todos os pacientes foram submetidos à inserção dos segmentos de anéis corneanos intraestromais. Citologia de impressão foi realizada em todos os olhos no pré-operatório, um mês e três meses após o "cross-linking" ou colírio de riboflavina, e novamente com seis meses, um ano e dois anos após a inserção dos segmentos de anéis. RESULTADOS: Pacientes do grupo "cross-linking" apresentaram melhora na adesividade das células epiteliais e proporção núcleo: citoplasma na conjuntiva temporal após o tratamento (P=0,008 e P=0,047), respectivamente. Na conjuntiva superior, houve um aumento na densidade das células caliciformes (P=0,037) e nível de organização da cromatina nuclear (P=0,010) após o tratamento. Pacientes do grupo colírio de riboflavina apresentaram melhora na adesividade das células epiteliais na conjuntiva superior após o tratamento (P=0,021). Na conjuntiva temporal, houve melhora na adesividade das células epiteliais (P<0,001), aumento na proporção núcleo: citoplasma (P<0,001), células caliciformes (P=0,001) e menor queratinização (P=0,011). Ambos os grupos não apresentaram alterações corneanas. O Teste exato de Fisher para comparação de citologia de impressão no escore total após o tratamento não revelou diferença entre os grupos. CONCLUSÃO: Apesar de mudanças em alguns parâmetros conjuntivais (adesividade das células epiteliais, proporção núcleo:citoplasma, nível de organização da cromatina nuclear, células caliciformes e queratinização), a comparação do escore total na citologia de impressão não apresentou diferença entre os grupos.

PURPOSE: To report the impression cytologic results after corneal cross-linking and insertion of intrastromal corneal ring segments for keratoconus. METHODS: Thirty-nine eyes were distributed into two groups: 1) cross-linking group (patients underwent corneal cross-linking procedure), and 2) riboflavin eyedrops group (patients received 0.1% riboflavin (w/v) eyedrops in 20% dextran solution for 1 month). After 3 months, all patients underwent insertion of intrastromal corneal ring segments. Impression cytologic specimens were obtained from all eyes at baseline, at 1 month and 3 months after cross-linking or riboflavin eyedrops, and again at 6 months, 1 year, and 2 years after intrastromal corneal ring segment insertion. RESULTS: Patients in the cross-linking group demonstrated improvement in the cell-to-cell contact of epithelial cells and the nucleus-to-cytoplasm ratio on the temporal conjunctiva after treatment (P=0.008 and P=0.047), respectively. On the superior conjunctiva, increases in goblet cell density (P=0.037) and level of organization of nuclear chromatin (P=0.010) after treatment were noted. Patients in the riboflavin eyedrops group demonstrated improvement in the cell-to-cell contact of epithelial cells on the superior conjunctiva after treatment (P=0.021). On the temporal conjunctiva, an improvement in the cell-to-cell contact of epithelial cells (P<0.001) and increases in the nucleus-to-cytoplasm ratio (P<0.001), goblet cell density (P=0.001), and less keratinization (P=0.011) were noted. No changes were identified on the cornea for either group. Fisher's exact test comparison of the impression cytologic total scores after treatment revealed no difference between groups. CONCLUSION: Despite changes in some conjunctival parameters (e.g., cell-to-cell contact of epithelial cells, nucleus-to-cytoplasm ratio, level of organization of nuclear chromatin, goblet cell density, and keratinization), comparison of the total impression cytologic scores revealed no difference between groups.

OBJETIVO: Avaliar pela citologia de impressão a superfície da córnea de doador vivo para transplante autólogo ou alógeno de células-tronco epiteliais. MÉTODOS: Vinte pacientes doadores de tecido límbico foram avaliados (17 para transplante autólogo e 3 para alógeno). Os exames citológicos foram realizados em dois momentos: antes da ceratectomia, que removeu tecido límbico dos quadrantes superior e inferior, e após o terceiro mês pós-operatório. RESULTADOS: Invasão de células da conjuntiva em direção ao centro além da margem da ceratectomia não ocorreu em nenhum olho estudado. Uma pequena área de conjuntivalização parcial, confirmada pela presença de células caliciformes, foi detectada dentro do limite da ceratectomia em 10% dos casos. CONCLUSÃO: A superfície central da córnea manteve-se transparente demonstrando que a manipulação de tecido límbico em doador vivo foi um procedimento seguro neste grupo de pacientes. Uma pequena porcentagem dos olhos pode ter o local do sítio da ceratectomia re-epitelizado com células da conjuntiva sobre a periferia da córnea.

PURPOSE: To evaluate by impression cytology (IC) the corneal surface of live limbal tissue donor eyes for autograft or allograft limbal stem cell transplantation (LSCT). METHODS: Twenty limbal donors were enrolled (17 for autograft LSCT and 3 for allograft). Impression cytology was performed before transplantation of superior and inferior limbal grafts and after the third postoperative month. RESULTS: Impression cytology analysis showed sheets of corneal epithelial cells and goblet cell absence beyond the edge of the keratectomy sites in all patients, suggesting that conjunctival invasion towards the center did not occur in any eye. Partial conjunctivalization within 2 to 3 clock hours, confirmed by the presence of goblet cells, was limited to the keratectomy site in 10% of the cases. CONCLUSION: A clear central corneal surface was demonstrated in all eyes following surgery leading to the conclusion that limbal donation was a safe procedure in this group of patients. A small percentage of eyes can have donor sites re-epithelized with conjunctival cells at the periphery of the cornea.

Apresenta-se relato de caso de paciente parda, com 47 anos de idade, havendo lesão pigmentada na margem palpebral inferior do olho direito, de aspecto irregular e heterogêneo, suspeitando-se clinicamente de lesão maligna. A paciente foi tratada com base no resultado da citologia de impressão e diagnosticada pelo exame histológico. Demonstra-se a importância da citologia para o planejamento da ressecção de lesões suspeitas como um método seguro e efetivo para assim se evitar cirurgias em áreas extensas da superfície ocular e de anexos.

A case of a patient with an irregular pigmented lesion of the lower eyelid margin simulating malignant tumor, which was treated based on the results of impression cytology and diagnosed by histopathological study is presented. The importance of cytological technique is emphasized as an effective and safe method that avoids unnecessary and extensive procedures.

OBJETIVO: Relatar as características da citologia de impressão de nevos conjuntivais referidos como mais perceptíveis. MÉTODOS: Trinta e cinco pacientes que notaram uma lesão conjuntival que se tornou mais perceptível, por mudança de cor ou de tamanho, foram avaliados. Ao exame biomicroscópico foi feito o diagnóstico clínico de nevo, sendo obtidas amostras de citologia de impressão das lesões com auxílio do papel filtro de acetato de celulose, coradas com PAS, H&E e Papanicolaou. Para os indivíduos que optaram também pela remoção da lesão, o tecido foi enviado para análise histopatológica. RESULTADOS: O exame de citologia de impressão revelou ninhos ou blocos de células névicas na camada epitelial, acompanhados ou não de células caliciformes em 32 casos (91,4%). Dez pacientes (28,5%) tiveram a lesão removida, sendo o diagnóstico histopatológico de nevo composto (um na carúncula, um na prega semilunar e seis na conjuntiva bulbar) e nevo subepitelial (dois na conjuntiva bulbar). CONCLUSÃO: A análise pela microscopia óptica das amostras de citologia de impressão confirmou o diagnóstico clínico ao demonstrar características típicas das camadas superficiais do nevo conjuntival em 91,4% dos pacientes. Nos nevos amelanóticos a citologia pode auxiliar no diagnóstico diferencial de outras lesões não pigmentadas. A técnica não substitui o exame histopatológico, mas pode ser útil na avaliação de células névicas em crianças e adultos.

PURPOSE: To report the impression cytology features of conjunctival nevi reported as more noticeable. METHODS: 35 patients who reported that a conjunctival lesion had become more noticeable after color or size change were enrolled. On slit-lamp examination, a clinical diagnosis of nevus was made and lesions underwent impression cytology using acetate cellulose strips and a combined staining with PAS, H&E and Papanicolaou. At patient's or parents' request, excision of the lesion was performed and the tissue was submitted to histopathological study. RESULTS: Impression cytology examination revealed nests or cluster of nevus cells within the epithelium layer containing or not mucous-secreting goblet cells in 32 cases (91.4%). Ten patients (28.5%) had the tumor removed and histopathological diagnosis was compound nevus in 8 eyes (1 from caruncle, 1 from plica semilunaris and 6 from bulbar conjunctiva) and subepithelial nevus from bulbar conjunctiva (2 eyes). CONCLUSION: Optical microscopy analysis of the impression cytology specimens confirmed the clinical diagnosis by demonstrating typical histopathological features of the superficial layers from conjunctival nevi in 91.4% of the cases. For amelanotic nevi IC can also allow a differential diagnosis from other nonpigmented lesions. The technique does not replace histopathological examination, but additionally, may assist in evaluating nevus cells in children and adults.

OBJETIVO: Avaliar se a utilização por via oral do óleo de linhaça (Linum usitatissimum), que diminui a inflamação na artrite reumatóide, pode auxiliar no tratamento da ceratoconjuntivite seca de portadores da síndrome de Sjögren. MÉTODOS: Em estudo clínico randomizado, 38 pacientes do sexo feminino, com diagnóstico de artrite reumatóide ou lúpus eritematoso sistêmico associadas à ceratoconjuntivite seca e síndrome de Sjögren, provenientes do ambulatório de Reumatologia do Hospital Universitário da Universidade Federal do Amazonas, foram consecutivamente selecionadas. O diagnóstico de ceratoconjuntivite seca foi baseado em questionário para olho seco (Ocular Surface Disease Index - OSDI®), Teste I de Schirmer, tempo de quebra do filme lacrimal com fluoresceína e instilação do corante rosa bengala a 1%, com intensidade da impregnação da superfíce ocular quantificada pela escala de van Bijsterveld. Todas as pacientes tiveram a inflamação da superfície conjuntival avaliada e quantificada por interpretação de exame de citologia de impressão conjuntival antes do início e ao final do estudo. As pacientes foram divididas em três grupos: Grupo I (n=13), Grupo II (n=12) e Grupo III (n=13). O Grupo I recebeu cápsulas com dose final de 1 g/dia de óleo de linhaça, o Grupo II recebeu cápsulas com dose final de 2 g/dia de óleo de linhaça e o Grupo III - controle - recebeu cápsulas com placebo, por 180 dias. RESULTADOS: Comparando os resultados no início e no final do tratamento, foram verificadas mudanças estatisticamente significantes (p<0,05) nos sintomas medidos pelo OSDI®, na inflamação da superfície ocular quantificada pela citologia de impressão conjuntival e nos testes I de Schirmer e tempo de quebra do filme lacrimal com fluoresceína nos Grupos I e II, quando comparados ao Grupo-controle. CONCLUSÃO: Terapia oral com óleo de linhaça, em cápsulas na dose de 1 ou 2 g/dia, reduz a inflamação da superfície ocular e melhora os sintomas de olho seco em pacientes portadores da síndrome de Sjögren. Estudos de longo prazo são necessários para confirmar o papel desta terapia como auxiliar no tratamento da ceratoconjuntivite seca de portadores da síndrome de Sjögren.

PURPOSE: To evaluate if oral flaxseed oil (Linum usitatissimum), which reduces the inflammation in rheumatoid arthritis, may help keratoconjunctivitis sicca's treatment in Sjögren's syndrome patients. METHODS: In a randomized clinical trial, 38 female patients with rheumatoid arthritis or systemic lupus erithematosus associated with keratoconjunctivitis sicca and Sjögren's syndrome were consecutively selected from patients of the Departament of Reumatology of the Amazonas University Hospital. Keratoconjunctivitis sicca diagnosis was based on a dry-eye symptom survey score (Ocular Surface Disease Index - OSDI®), Schirmer-I test, fluorescein break-up time, 1% Rose Bengal staining of ocular surface measured by the van Bijsterveld scale. All patients had ocular surface inflammation evaluated and quantified by conjunctival impression cytology, before and after the study. The subjects were divided into three groups with 13 (Group I), 12 (Group II) and 13 (Group III) patients. Group I received flaxseed oil capsules with a final 1 g/day dosis, Group II flaxseed oil capsules with a final 2 g/day dosis and Group III - controls - placebo, for 180 days. RESULTS: Comparing the results at the beginning and at the end of the treatment, statistically significant changes (p<0.05) in symptoms (OSDI®), ocular surface inflammation quantified by conjunctival impression cytology, Schirmer-I test and fluorescein break-up time occurred in Groups I e II when compared to controls. CONCLUSIONS: Therapy with oral flaxseed oil capsules 1 or 2 g/day reduces ocular surface inflammation and ameliorates the symptoms of keratoconjunctivitis sicca in Sjögren's syndrome patients. Long-term studies are needed to confirm the role of this therapy for keratoconjunctivitis sicca in Sjögren's syndrome.

Relatamos três casos de infecção corneana por Acanthamoeba sp em que foi possível detectar cistos do microorganismo com a técnica de citologia de impressão. Três pacientes encaminhados ao Laboratório de Doenças Externas Oculares em 2004 com alterações superficiais da córnea foram submetidos ao exame de citologia de impressão para investigação da presença de cistos de Acanthamoeba sp. Duas amostras foram obtidas da córnea de cada paciente e coradas com PAS, hematoxilina e Papanicolaou. Investigação microbiológica de rotina e cultura também foram realizadas após raspado da córnea. O cultivo das amostras e a citologia de impressão foram positivas para Acanthamoeba sp em todos os pacientes, ao passo que os raspados corados com Giemsa foram positivos em dois casos. A citologia de impressão revelou cistos de Acanthamoeba sp entre feixe de células epiteliais corneanas e como células isoladas. Foram observados cistos no epitélio de um dos pacientes com a citologia de impressão após três meses de tratamento, enquanto o raspado foi negativo. No exame anatomopatológico observaram-se cistos no epitélio e estroma de uma córnea receptora de um dos pacientes após transplante. Neste estudo, a citologia de impressão detectou com sucesso cistos de Acanthamoeba sp em pacientes com acometimento epitelial. Por tratar-se de método não invasivo, a técnica pode ser usada para facilitar o diagnóstico mais precoce da infecção por Acanthamoeba, sendo útil também no acompanhamento do tratamento da doença.

To describe three cases of corneal infection due to Acanthamoeba sp in which was possible to detect Acanthamoeba sp cysts by the corneal impression cytology technique. Three patients referred to the External Eye Disease Laboratory in 2004 with superficial corneal alterations were submitted to corneal specimen collection by impression cytology filter paper to investigate the presence of Acanthamoeba sp cysts. Two impression cytology samples were obtained from each patient and were stained by PAS, hematoxylin and Papanicolaou. Routine microbiological investigation and culture were also performed using corneal scraping. Positive culture and impression cytology for Acanthamoeba sp was observed in all patients while smears with Giemsa stain were positive in two. Impression cytology Acanthamoeba sp cysts were observed among sheets of corneal epithelial cells and as isolated cells. Cysts were also found in the superficial epithelium in one of these patients after treatment while corneal scraping did not reveal any cyst. Histopathology revealed cysts in the epithelium and stroma in a transplanted cornea in one of these patients. The first description of impression cytology as a diagnostic method for Acanthamoeba keratitis occurred recently. In this study corneal impression cytology detected Acanthamoeba sp cysts successfully in these patients with only superficial involvement. Impression cytology as a non invasive technique can be used to facilitate early recognition of Acanthamoeba infection playing a useful role in the follow-up of the disease.

OBJETIVO: Observar as principais manifestações oculares de pacientes portadores de rosácea e avaliar o custo-benefício dos exames diagnósticos realizados. MÉTODOS: Vinte pacientes com acne rosácea do Ambulatório de Dermatologia da Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) foram entrevistados por meio de um questionário, submetidos ao exame oftalmológico e aos testes de Schirmer I, fluoresceína, rosa Bengala, citologia de impressão e raspado conjuntival. O levantamento de custos destes exames foi feito a partir da tabela do Sistema Único de Saúde (SUS), medicina de grupo (AMB 90) e valores cobrados no serviço particular. RESULTADOS: De um total de 20 pacientes que iniciaram o estudo, 16 compareceram a todas as consultas. Houve predomínio do sexo feminino (55%), raça branca (95%) e a média de idade foi de 56 anos. Todos os pacientes apresentaram sinais e sintomas clínicos e os principais foram: prurido (40%), lacrimejamento (35%), sensação de corpo estranho (30%), embaçamento visual (25%), telangiectasia palpebral (70%), hiperemia palpebral (70%), meibomite (65%), blefarite (50%). Os exames subsidiários realizados mostraram-se, em sua maioria, dentro da normalidade. Houve diferença no levantamento de custos das diferentes fontes pagadoras. CONCLUSÕES: As principais manifestações oculares de pacientes portadores de rosácea foram sinais e sintomas relacionados com disfunção das glândulas de Meibomius. Considerando os custos dos exames realizados e os resultados obtidos, concluímos que a consulta oftalmológica é a que apresenta melhor custo-benefício para o paciente portador de rosácea.

PURPOSE: To observe the main ocular manifestations of patients with rosacea and to evaluate the cost-benefit of supplementary diagnostic examinations. METHODS: Twenty patients with acne rosacea from the Dermatology Service of the São Paulo Federal University (UNIFESP) were interviewed through a questionnaire, submitted to ophthalmologic examination and tested with Schirmer I, fluorescein and rose Bengal staining, impression cytology and conjunctival scrub. The costs of these examinations were abstracted from the Public Health System's values (SUS), Brazilian Medical Association values (AMB) and values charged by a private service. RESULTS: Twenty patients were enrollet initially in the study, but only 16 completed it. Eleven patients were female (55%), 19 were white (95%) and the average age was 56 years. All patients had at least one complaint related to rosacea. The most common symptoms were itching (40%), tearing (35%), foreign body sensation (30%). The most common signs were telangiectasis of lid margins (70%), hyperemia of lid margins (70%), meibomitis (65%) and blepharitis (50%). Most subsidiary examination showed normal results. There was difference of costs between the different paying sources. CONCLUSIONS: The main ocular manifestations in rosacea were related with meibomian gland disease. Considering the subsidiary examination costs and their results, the ophthalmologic check-up presents the best cost-benefit for the patient with rosacea.

OBJETIVO: Estudar as alterações conjuntivais provocadas pela inflamação crônica na ceratoconjuntivite primaveril por meio da citologia de impressão. MÉTODOS: Foram analisadas amostras do epitélio conjuntival de 30 pacientes com ceratoconjuntivite primaveril e 30 indivíduos normais. O material foi colhido da conjuntiva bulbar superior, utilizando papel de filtro com poros de 0,45 µm. Em seguida, o material foi fixado e, após 4 dias, corado com PAS, hematoxilina eosina e Papanicolaou modificado. A leitura das lâminas foi realizada por meio de microscopia óptica e foram avaliados os seguintes parâmetros: células polimorfonucleares, junções intercelulares, mucina, células caliciformes e relação núcleo/citoplasma. Após isso, cada lâmina foi graduada segundo a escala de Nelson. O nível de significância estatística foi de 5%. RESULTADOS: Nos casos com ceratoconjuntivite primaveril observaram-se mais células polimorfonucleares, maior comprometimento das junções intercelulares, menor quantidade de mucina e maior alteração na relação núcleo/citoplasma que no grupo controle. Não houve diferença na quantidade de células caliciformes. A graduação pela escala de Nelson mostrou acometimento generalizado da conjuntiva na ceratoconjuntivite primaveril. CONCLUSÃO: A citologia de impressão é capaz de identificar o grau de acometimento conjuntival dos pacientes com ceratoconjuntivite primaveril.

PURPOSE: To study conjunctival surface changes caused by chronic inflammation in vernal keratoconjunctivitis using impression cytology. METHODS: Samples of conjunctival epithelium were collected from 30 patients with vernal keratoconjunctivitis and 30 patients without ocular diseases that were used as a control group. Each sample was collected from the superior bulbar conjunctiva using filter paper with 0.45µm pores. The material was then fixed and dyed with PAS, HE, and modified Papanicolaou. The tissue was examined with an optical microscope evaluating the following parameters: polymorphonuclear cells, intercellular junctions, mucin, goblet cells, and nuclear/cytoplasm (N/C) ratios. Thereafter, each sample was graded using the Nelson classification. RESULTS: Samples from patients with vernal keratoconjunctivitis presented larger amounts of polymorphonuclear cells, smaller amounts of mucin, and more alterations in the nuclear/cytoplasm ratios than in the control group. The amount of goblet cells did not vary. The Nelson classification showed a general inflammatory involvement of the conjunctiva in vernal keratoconjunctivitis. CONCLUSION: Impression cytology was able to evaluate and characterize the degree of inflammatory involvement of the conjunctiva in vernal keratoconjunctivitis.

OBJETIVO: Analisar pela citologia de impressão a presença de células caliciformes na superfície de córneas com sinais clínicos de conjuntivalização. MÉTODOS: Foram realizados exames de citologia de impressão do epitélio córneo-conjuntival em 65 olhos de 65 pacientes com sinais clínicos de conjuntivalização com ou sem tratamento cirúrgico prévio. Os pacientes foram divididos em dois grupos segundo a história anterior de cirurgia de reconstrução da superfície ocular com transplante de limbo e membrana amniótica de tal forma que no grupo I foram estudados 49 pacientes sem cirurgia prévia e no grupo II estudaram-se 16 pacientes após cirurgia para reconstrução da superfície e com sinais de conjuntivalização recorrente. As amostras foram colhidas do olho afetado entre fevereiro de 2000 e fevereiro de 2002 no Laboratório de Doenças Externas Oculares do Departamento de Oftalmologia da UNIFESP. Definiu-se que o diagnóstico de deficiência límbica era confirmado por citologia de impressão quando uma ou mais células caliciformes íntegras eram encontradas na superfície da córnea. RESULTADOS: No grupo I uma ou mais células caliciformes foram evidenciadas na superfície da córnea em 21 olhos (42,85%). No grupo II foi possível detectá-las na superfície da córnea em 9 pacientes (56,25%). CONCLUSÃO: A presença de células caliciformes na superfície da córnea detectada no exame de citologia de impressão em pacientes com conjuntivalização pode confirmar o diagnóstico de deficiência de limbo no local pesquisado, porém, a ausência destas células não exclui o diagnóstico.

PURPOSE: To analyze by impression cytology the presence of goblet cells on corneal surfaces with conjunctivalization. METHODS: Corneal-conjunctival impression cytology was performed in 65 eyes of 65 patients who had clinical signs of conjunctivalization with or without previous ocular surgery. Patients were classified into two groups according to previous history of ocular surface reconstructive surgery associated with limbal transplantation and human amniotic membrane. In group I, 49 patients without previous ocular surgery were evaluated and in group II 16 patients were included after ocular surface reconstructive surgery with conjunctivalization recurrence. Samples were obtained in the affected eye between February 2000 and February 2002 at the UNIFESP's External Eye Disease Laboratory. Limbal deficiency was detected when one or more goblets cells were found on the corneal surface. RESULTS: In group I one or more goblet cells were found on the corneal surface of 21 eyes (42.85%). In group II goblet cells were found on the corneal surface of 9 patients (56.25%). CONCLUSION: Presence of goblet cells on the corneal surface detected by impression cytology in patients with conjunctivalization can confirm limbal stem cell deficiency, however, its absence does not exclude the diagnosis.